جستجو ژن رمز گذار اینترونی آنزیمreverse transcriptase مقاوم به گرما (موسوم به (trt gene از سویه بومیbacillus و همسانه سازی آن در e.coli
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه
- نویسنده فهیمه عرفانی تبار
- استاد راهنما شیرین قربانی سعید سپهری سرشت
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1390
چکیده
باکتری ها کارخانه های بی همتای بیولوژیک در تولید محصولات زیست فناوری هستند ویژگی-هایی نظیر تحمل شرایط خاص رشد و تولید آنزیم های مختلف، باکتریها را برای بهره برداری مورد توجه قرار داده است. عده ای از باکتری ها واجد عوامل ژنتیکی با قابلیت جابه جایی هستند. نظیر اینترون های گروه ii که سه آنزیم با ارزش وارونوشتاز , ( reverse transcriptase) اندونوکلئاز ,(endonuclease) مچوراز (maturase) رارمز می کنند. ژن trt، آنزیم وارونوشتاز مقاوم به حرارت در سویه geobacillus stearothermophilus strain 10 را رمز می کند محصول آن با قدرت تحمل دما تا 75 درجه سانتیگراد کاربرد زیادی در rt pcr و ساخت کتابخانه های ژنومی cdna دارد. هدف از مطالعه شناسایی سویه های geobacillus بومی دارای ژن rt می باشد. در این جهت ابتدا پرایمرهای طراحی شده در این بررسی برای شناسایی ژن استفاده شد. غربال گری اولیه از مجموعه ی باکتری های بومی برای شناسایی ژن trt نتیجه ای در بر نداشت بنابراین در این مرحله سویه ی geobacillus stearothermophilus ptcc 1713 برای شناسایی ژن مورد نظر و سویه geobacillus stearothermophilus strain 10 به عنوان کنترل مثبت با pcr مورد بررسی قرارگرفت که نتیجه ی آن تولید دو قطعه dna با اندازه-هایی مشابه قطعه ی مورد نظر و شباهت نتایج برای هر دو باکتری بومی و استاندارد بود. همسانه سازی هر دوقطعه در حامل های ptz 57 r و pet 28 a انجام شد و بعد تعیین توالی جهت تعیین هویت قطعات همسانه سازی شده انجام شد. اطلاعات حاصل از تعیین توالی همسانه ها نشان داد با وجود اینکه شباهت توالی نوکلئوتیدی با ژن trt زیاد نبود اما در یکی از قطعات بخشی از توالی همسانه سازی شده با یک وارونوشتاز از گیاه zingiber بیش از 97% شباهت وجود داشت پیامد های این یافته می تواند در راستای پیگیری تنوع بالا در ژن های رمز گذار rt و بیان گرفتن از ژن رمز گذار و همچنین بررسی فعالیت آنزیمی آن قابل توجه باشد. کلمات کلیدی: geobacillus stearothermophilus ، ژن اینترونی رمزگذار آنزیم وارونوشتاز trt، همسانه سازی
منابع مشابه
مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure
کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...
متن کاملهمسانه سازی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا دیسانتری بومی
سابقه و هدف: بیماری شیگلوز از علل عمده ابتلا کودکان به اسهال در ایران است و ژن virG نقش کلیدی را در بیماری‌زایی و قدرت تهاجم باکتری شیگلا بازی می‌کند. هدف از این مطالعه، همسانه سازی، توالی یابی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا بومی با هدف ساخت سویه کاندید واکسنی زنده تقلیل حدت یافته است. روش بررسی: با استفاده از آزمون‌های بیوشیمیایی، سویه شیگلای بوم...
متن کاملهمسانه سازی تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی درون وکتور pET28a(+) و انتقال آن به باکتری اشریشیاکلی سویه DH5α
سابقه و هدف: پوشش گلیکوپروتئینی E2 ویروس هپاتیت سی برای ورود ویروس به سلول های میزبان مورد نیاز است، همچنین به دلیل اختلاف توالی نوکلئوتیدی در ناحیه C ترمینال ژن E2 تنوع ویروسی به وجود می آید که موجب پایداری عفونت می گردد، در نتیجه این ژن هدف اصلی برای تولید آنتی بادی های خنثی کننده و ساخت واکسن می باشد. در این تحقیق نیز جهت مطالعات مقدماتی، تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت ...
متن کاملبررسی تغییر ژن پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در بیان آن درباکتری Ecoli سویه BL21
Aim and Background: By Attention to gene sequence and each amino acid codon in host which express protein, also in order to probable vaccine production against influenza A, a major cause of mortality in a year,this research was carried out. M2 protein is conserved and it can be a proper candidate vaccine for influenza infection. Materials and Methods: Present research was an experimental study....
متن کاملهمسانه سازی و بیان ژن trt رمز کننده آنزیم وارونوشتاز از باکتری گرمادوست geobacillus stearothermophilus strain 10 و بررسی فعالیت آنزیمی آن
فرایند وارونویسی (reverse transcription)همراه با ازدیاد (rt-pcr) dna روش قوی مولکولی است که برای تشخیص، تعیین کمیت و بررسی بیان ژن و ویروس های rna دار، کاربرد بسیاری دارد. کارایی این واکنش ها بیشتر به ویژگی های مولکولی آنزیم های وارونوشتاز(reverse transcriptase) موجود وابسته است. ساخت cdna در دمای بالا مزیت های بسیاری دارد از جمله حذف ساختارهای دوم rna و بنابر این وارونوشتازهای پایـدار حرارتی، ...
15 صفحه اولمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023